东北接骨木组培快繁手艺规程DOC

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  LY/T ××××—2011 PAGE II PAGE 2 省市场监视办理局 发布××××-××-××实施××××- 省市场监视办理局 发布 ××××-××-××实施 ××××-××-××发布 东北接骨木组培快繁手艺规程 DB23/T ××××—2018 DB23 省处所尺度 ICS 65.020.01 B 64 前 言 本尺度根据GB/T 1.1-2009的编写法则草拟。 本尺度由省丛林工业总局提出。 本尺度草拟单元:省林业科学研究所、省林业科学院、东北农业大学。 本尺度次要草拟人:马盈、李红艳、兰士波、张玲、、舒钰、王钰婷、王艳红、李天芳、李思雯、张玉富。 PAGE 2 东北接骨木组培快繁手艺规程 1 范畴 本尺度了东北接骨木[Sambucus mandshurica Kitag.]组培快繁手艺的培育基制备、外植体选择取处置、分化取增殖培育、生根培育、炼苗及移栽和手艺档案。 本尺度合用于东北接骨木组织培摄生产。 2 规范性援用文件 下列文件对于本文件的使用是必不成少的。凡是注日期的援用文件,仅注日期的版本合用于本文件。凡是不注日期的援用文件,其最新版本(包罗所有的点窜单)合用于本文件。 LY/T 1882 HYPERLINK /kns/detail/detail.aspx?QueryID=15&CurRec=4&dbcode=SCSD&dbname=SCSD&filename=SCSDLY/T%201882-2010 \t _blank 林木组织培育育苗手艺规程 3 培育基制备 3.1 培育基 不定芽分化培育基:1/2MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L,pH5.8。 增殖培育基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L,pH5.8。 生根培育基培育:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+琼脂6.0 g/L+蔗糖30 g/L,pH5.8。 3.2 培育基灭菌 瓶拆培育基需正在10 h内完成灭菌,采用高压蒸汽灭菌锅灭菌,正在压力0.105 MPa、温度121 ℃前提下灭菌20 min~25 min。 3.3 培育基保留 灭菌后的培育基放入接种室,常温前提下7d内利用,2 ℃~4 ℃前提下14 d内利用。培育基应保留于干净中,留意避光和防尘。 4 外植体选择取处置 4.1 外植体的选择 选择发展健壮、无病虫害的植株做为采样母株,剪取母树昔时嫩枝茎段做为外植体,外植体大小正在2 cm~4 cm之间。 4.2 外植体灭菌 先将外植体用洗涤剂做概况清洗,断根概况的灰尘,再将外植体用流水冲刷30 min后,放入消毒瓶中。把拆有外植体的消毒瓶用75%的酒精棉擦拭后放入超净工做台,正在超净工做台上打开拆有外植体的消毒瓶,倒入75 %酒精并摇晃消毒瓶,浸泡消毒30 s,倒去酒精,用无菌水冲刷外植体3次~5次;然后用0.1 % HgCl2浸泡5 min,无菌水冲刷4次~5次,并浸泡30 min,再用无菌滤纸吸干外植体概况的水分。 4.3 外植体切割 将概况消毒后的外植体切割,两头各剪去2 mm,连结茎段长度1.5 cm~2.5 cm,接种至分化培育基中。 5 分化取增殖培育 5.1 分化培育 先将培育瓶的封口膜悄悄取下,放正在一边,将培育瓶口倾斜正在酒精灯外焰上扭转灼烧消毒。将枪式镊子正在酒精灯上灼烧消毒并冷却后,将切割好的外植体放入不定芽分化培育基中,每个培育瓶放3个外植体,接种后盖上封口膜,并标注日期。培育室的温度节制正在25 ℃±3 ℃,相对空气湿度节制正在70 %~80 %,光照强度为1500lx~2000lx,光照时间为12 h/d。培育20 d~25 d。 5.2 增殖培育 外植体经分化培摄生成愈伤组织及不定芽,将其转接至增殖培育基中,继代培育30 d~35 d,培育前提同5.1。 6 生根培育 拔取培育瓶中长度1.5 cm~3.0 cm发展健壮的不定芽接种至生根培育基中,培育20 d~30 d,培育前提同5.1。 7 炼苗及移栽 7.1 炼苗 7.1.1 炼苗尺度 当组培苗基部长出3条以上,长度达1.0 cm~3.0 cm的根系,即可进行炼苗处置。 7.1.2 炼苗方式 将组培苗转移到日光温室中,天然散射光下炼苗,温度节制正在20 ℃~25 ℃,空气相对湿度正在70 %~80 %,每天半夜正在培育瓶四周喷洒雾水。3 d后揭去封口膜,2 d~4 d后即可移栽。 7.2 移栽 取出组培苗,用清水洗去苗基部的培育基,移栽至拆有细沙、蛭石和珍珠岩(夹杂比例为1:1:1)的夹杂基质的育苗盘中。育苗盘规格为35 cm×50 cm,育苗盘四壁高度不该低于7 cm,育苗基质放入育苗容器并浇透水后,厚度不该小于5 cm,水渗干后再覆上一层土。 温室应连结70 %~80 %的空气湿度,温度应正在18 ℃~25 ℃,按照土壤湿度赐与植株适度的浇水处置,育苗办理按照LY/T 1882进行。 8 手艺档案 应成立东北接骨木种苗组培快繁手艺档案,内容包罗:材料来历、外植体类型、培育基类型、动物发展调理剂类型浓度、率、污染率、增殖系数、生根率以及移栽成活率。

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